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【PCR儀的種類(lèi)】
　　分類(lèi)總是五花八門(mén)，總體來(lái)說(shuō)可以分為PCR擴(kuò)增儀和實(shí)時(shí)熒光PCR儀兩大類(lèi)，有人也把它們稱(chēng)為半自動(dòng)和全自動(dòng)，或者定性和定量，都是比較不準(zhǔn)確的稱(chēng)呼。

　　PCR最重要的就是個(gè)升降溫過(guò)程，最初的水浴鍋式PCR，就是三個(gè)水浴箱，一個(gè)機(jī)械臂，定時(shí)抓出反應(yīng)槽轉(zhuǎn)換水浴鍋。這種東東體積大，迅速慢，但其實(shí)結(jié)果并不比以后的PCR儀差，我現(xiàn)在都很欣賞。后來(lái)有人利用致冷和加熱做成了，固定位置升降溫的PCR擴(kuò)增儀。


　　后來(lái)隨著定量技術(shù)的發(fā)展，有公司將擴(kuò)增儀和檢測(cè)做成一體，也就成了現(xiàn)在所謂的全自動(dòng)（或定量）PCR儀。當(dāng)然標(biāo)準(zhǔn)的叫實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。

　　【品牌】

　　什么東西都有品牌，現(xiàn)在國(guó)內(nèi)國(guó)外PCR儀的品牌很多，就國(guó)外而言比較著名的有：

　　ABI美國(guó)應(yīng)用生物公司：老牌的生物公司貴族，其收購(gòu)了原來(lái)的PE，而PE公司是PCR的*，旗下有很多經(jīng)典的PCR儀，有5700（已停產(chǎn)）、7700（已停產(chǎn)）、7000、7900等實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。

　　ROCHE羅氏診斷：炙手可熱的新貴，LIGHTCYCLER是其的PCR儀，市場(chǎng)做得很不錯(cuò)，以科研定位為主，但在國(guó)內(nèi)很多醫(yī)院使用，其很特色離心、氣加熱、毛細(xì)管等，設(shè)計(jì)另類(lèi)，是最有特色的PCR儀，當(dāng)然好壞另議，就單其另辟蹊徑的技術(shù)能力和膽識(shí)就值的佩服。


　　MJ：剛?cè)胫袊?guó)的名流，MJ的擴(kuò)增儀在生命科研領(lǐng)域比較出名，其產(chǎn)品比較適合高通量檢測(cè)，人類(lèi)基因組計(jì)劃用得很多。其實(shí)時(shí)熒光PCR儀剛進(jìn)入中國(guó)不久，孔間能使用不同溫度是其特色。這點(diǎn)其實(shí)比較有用。

　　伯樂(lè)：呵，廉價(jià)的麥當(dāng)勞，ICYCLER是其主打，進(jìn)入中國(guó)已經(jīng)比較久了，產(chǎn)品和5700一樣，是擴(kuò)增儀上加裝定量模塊而成，特點(diǎn)是價(jià)格較低。

　　國(guó)內(nèi)現(xiàn)在做的也很多，比如杭州博日、杭州朗基、上海楓嶺、廈門(mén)安普利等。

　　【選購(gòu)】

　　準(zhǔn)確的講包括實(shí)時(shí)熒光定量在內(nèi)都沒(méi)有自動(dòng)加樣和標(biāo)本處理系統(tǒng)，只能算半自動(dòng)的。PCR儀是個(gè)簡(jiǎn)單的東東，一個(gè)溫控設(shè)備和一個(gè)檢測(cè)設(shè)備而已。

　　關(guān)于溫控，主要是介質(zhì)問(wèn)題。理想的介質(zhì)是導(dǎo)熱性好、比熱大、接觸緊密的東東。

　　這方面好的是水浴和油浴，比熱大（油比水更大）、溶劑化物體，與反應(yīng)物無(wú)縫接觸，效果當(dāng)然最好。但是自動(dòng)化，小型化難，只有最初的水浴鍋式使用。

　　硅加熱，這是使用普遍的一種，優(yōu)點(diǎn)：易自動(dòng)化、速度快、直接加熱降溫，效果當(dāng)然好，但是第一成本較高，第二其使用的介質(zhì)是金屬，導(dǎo)熱雖然好，但是與反應(yīng)管，很難做到無(wú)縫接觸，定性時(shí)代可以加油，但用熒光定最，由于油有熒光信號(hào)不能用。所以在無(wú)縫接觸上差一些。第三由于是底部加熱，下部壓力較大，有溢出的可能，不過(guò)新的儀器在加熱蓋以后解決了這個(gè)問(wèn)題。

　　空氣加熱，用空氣做介質(zhì)有優(yōu)點(diǎn)，與反應(yīng)體系無(wú)縫接觸，但是空氣的導(dǎo)熱性差、比熱小的弱點(diǎn)明顯。因此空氣加熱的要利用離心來(lái)產(chǎn)生空氣流動(dòng)，增強(qiáng)導(dǎo)熱性，同時(shí)使用毛細(xì)管，加大接觸面積、試劑微量化來(lái)彌補(bǔ)。這樣做了以后效果還是不錯(cuò)。但有的廠商把什么離心、毛細(xì)管的好處大講特講，對(duì)氣加熱的弱點(diǎn)閉口不談，卻是高明的市場(chǎng)手法。同時(shí)，使用離心，對(duì)標(biāo)本量增大是有影響的并且標(biāo)本量越大，空氣比熱小的弱點(diǎn)就越明顯，所以空所加熱的儀器標(biāo)本量都比較小。使用毛細(xì)管后由于反應(yīng)液與管的接觸面積增大，吸附現(xiàn)象更大，因此試劑的通用性差一般要專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)，成本高，雖然試劑用量少，但因?yàn)槭菍?zhuān)用試劑，每人份就是以實(shí)際量算，并不省試劑。反而增加了毛細(xì)管成本。

　　關(guān)于功能，所有的PCR儀功能都大體相同。只有MJ孔間能使用不同溫度比較，這對(duì)于多項(xiàng)目同時(shí)檢測(cè)以及循環(huán)參數(shù)的調(diào)整比較有用。但其實(shí)時(shí)熒光的儀器剛進(jìn)入中國(guó)不久，具體如何還不得而知。

　　關(guān)于選購(gòu)，根據(jù)單位情況而定，由于PCR的技術(shù)含量其實(shí)并不高，好的國(guó)產(chǎn)儀器如杭州博日（與日本著名廠商大和有關(guān)）也差不太多。關(guān)于進(jìn)口儀器，羅氏的儀器不錯(cuò)，但如果標(biāo)本量大，建議不要用羅氏。一則會(huì)累死的。另外，每個(gè)標(biāo)本要分?jǐn)偟臉?biāo)準(zhǔn)曲線、對(duì)照成本太高。同時(shí)，試劑也比較受限。